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对电泳仪的一些误差来源分析

点击次数:2121 更新时间:2022-11-25
   电泳是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术。可以实现电泳分离技术的仪器称之为电泳仪
  凝胶电泳是分子生物学中用于DNA分析的主要方法之一。此方法涉及DNA片段通过凝胶的迁移,在凝胶中它们根据大小或形状分开。但是,即使是科学上合理的方法,例如凝胶电泳,也无法避免产生误差,对于误差的常见因素如下:
  1.样品污染
  电泳法的主要应用是在分子生物学中分析DNA的工具,但在法医学中也用作鉴定违法现场样本的手段。为了获得准确的结果,小化此技术中的错误来源很重要。错误的来源之一是DNA样品的污染。如果样品中有外源DNA,则凝胶中的条带比仅包含纯化样品的凝胶中的带多。
  2.凝胶、电流和缓冲液问题
  电源稳压器用于保持凝胶电泳中的电压稳定。凝胶的浓度也必须正确以避免错误。如果浓度太高或太低,碎片将迁移得太慢或太快。这将导致解析不同频段时出现错误。在电泳过程中,必须注意确保电压稳定。电压的任何波动都将导致DNA片段不稳定迁移,从而导致条带读取错误。缓冲溶液还必须具有正确的组成,因为具有错误pH或离子浓度的缓冲液会改变DNA片段的形状,并改变其迁移时间。
  3.正确的可视化
  可视化凝胶中的每个条带代表一组大小相同的DNA片段。重要的是凝胶必须正确可视化。如果用于可视化样品的染料或放射性探针的浓度太高,则生成的图像将非常混乱,因为残留碎片也将可视化。如果凝胶浓度太低,将无法可视化。在所有阶段都遵循正确的过程后,凝胶电泳仪将得出准确且可以放心使用的结果。
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